Vivaspin 500, < 0.6 ml 시료용
Sartorius Stedim Biotech, 독일

q 최적의 농축 실험 결과를 위한 Tips

- 멤브레인 MWCO(Molecular Weight Cut-Off) 선택은?

최상의 회수율을 얻기 위해서, 농축하려는 물질의 분자량에 비해 1/2 ~ 1/3 크기의 멤브레인 MWCO를 선택합니다.

(예) 농축하려는 Target 단백질 분자량이“90,000 MW”인 경우

☞ Vivaspin 30,000 MWCO 선택

- 농축 실험 시간에 영향을 주는 요인들은?

MWCO, 유공성(porosity), 시료농도, 점도, 원심분리속도, 온도 등이 있습니다.

(예) 버퍼 안에 단백질이 5% 이상이면, 농축 속도가 현저히 떨어짐

(예) 4 ℃에서 실험하는 경우, 25℃에서 실험하는 것보다 1.5배 느려짐

(예) 50% 글리세린과 같은 점도가 높은 시료로 실험하게 되면,   일반 버퍼 내의 시료를 이용한 실험보다 최대 5배 이상의 시간이 소요됨.

- 실험 전, 필터 전처리 필요성은?

농축 멤브레인에는 보습제인 극미량의 글리세린과 Sodium azide(아지드화나트륨)이 함유되어 있습니다. 따라서 실험 전, 전처리를 추천합니다.

[방법]

1. 단백질 용액에 사용되는 동일한 버퍼 또는 초순수를 채워 놓는다.

2. 실험 전, 여과 튜브에 흘러 나온 액은 버리고, 필터를 원심기로 돌려준 후, 농축 실험 시작!

(주의! 멤브레인을 마른 상태로 두지 말 것!)